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  • 2019
    單克隆抗體亞型及結構、分子量
    單克隆抗體亞型及結構、分子量

    1.單克隆抗體主要有5種類型(IgA、IgD、IgE、IgG、IgM)。其中IgG型抗體因具有較長的體內半衰期并且能與人體免疫系統發生較強的相互作用。2.IgG相對分子量約為150KDa,IgA相對分子量約為160KDa,IgM相對分子量約為190KDa,IgD相對分子量約為184KDa,IgE相對分子量約為196KDa。

  • 2013
    單抗制備-細胞融合篩選過程中遇到的問題及對策

    1,融合率低,陽性孔少①免疫的問題。由于免疫原性不強或者免疫途徑不當造成免疫弱,效價低。②融合過程中溫度、時間、PEG分子量,作用時間等。③脾細胞是否取出了足夠多的細胞,有無組織碎片干擾。④融合前骨髓瘤細胞生長狀態是否完好,細胞是否渾圓,透亮,成對數生長。2,單抗親和力整體低①免疫的問題。免疫途徑不當或者免疫原問題。②融合細胞篩選過程出現遺漏,篩選方法不當或檢測方法不當,造成沒有篩到高親和力的融合細胞。③由于亞克隆細胞生長環境不合適,導致融合細胞染色體丟失,分泌特性改變,親和...

  • 2013
    骨髓瘤細胞SP2/0 培養過程中遇到的問題及對策

    1,細胞長的慢或細胞死亡正常生長情況下,細胞一天傳代一次,生長越好,貼壁越多對策:①培養基配方不對;②接種密度太低,低于10的4次方;③污染了支原體或者其他不明細菌,支原體的現狀是出現小黑點;細菌污染是渾濁;霉菌污染是出現白色肉眼可見菌落;不明細菌污染出現砂狀平鋪背景,視野發暗。④細胞瓶刷洗不干凈2,細胞形態異常正常生長情況下,細胞渾圓,透亮,成對數生長,生長越好,貼壁多,懸浮少對策:①培養基配方不對;②接種密度太低,低于10的4次方;③污染了支原體或者其他不明細菌,支原體的...

  • 2013
    高親和力單克隆抗體制備問題及對策

    一、單抗制備-骨髓瘤細胞SP2/0培養過程中遇到的問題及對策1,細胞長的慢或細胞死亡正常生長情況下,細胞一天傳代一次,生長越好,貼壁越多對策:①培養基配方不對;②接種密度太低,低于10的4次方;③污染了支原體或者其他不明細菌,支原體的現狀是出現小黑點;細菌污染是渾濁;霉菌污染是出現白色肉眼可見菌落;不明細菌污染出現砂狀平鋪背景,視野發暗。④細胞瓶刷洗不干凈2,細胞形態異常正常生長情況下,細胞渾圓,透亮,成對數生長,生長越好,貼壁多,懸浮少對策:①培養基配方不對;②接種密度太低...

  • 2013
    單抗腹水制備過程中遇到的問題及對策

    1,腹水少或者無腹水產生①致敏不正確,不正確的使用致敏劑,或者致敏時間與接種雜交瘤的時間相差太久,一般是7-14天,具體看小鼠的腹部情況。②雜交瘤細胞或者致敏劑的接種位置不正確,沒有打到腹腔,而是打到了皮下。③接種的雜交瘤細胞數量太少,太多或者細胞狀態不好。一般不50萬個細胞左右為宜。④建議使用母鼠或者生育過的母鼠制備腹水。2,腹水沒有效價①制備腹水的雜交瘤極不穩定,打到小鼠身上之前就失去抗體分泌能力或者打到腹腔內就失去了分泌能力。②致敏小鼠時采用了錯誤的致敏劑。③接種的雜交...

  • 2012
    ELISA試劑盒使用及開發過程中常見問題及對策

    現象可能原因解決方法板條不顯色或者無相應數值試劑使用順序混亂,或操作步驟出錯嚴格遵循實驗說明重復實驗使用了不同批次的試劑確保試劑來自同一試劑盒板條受潮嚴重板條要封好,干燥劑失效要及時更換低吸光度OD值試劑過期,或者不同的批次混用查證過期試劑和批次洗液配制錯誤、洗滌浸泡時間過長按照說明書要求洗滌,并正確配制洗液孵育時間過短按照說明書要求,嚴格計算好時間試劑污染確保吸取不同液體更換新的槍頭和盛放器皿試劑溫度過低根據試劑體積大小回溫時間相應延長,確保試劑*回溫使用錯誤波長讀數,或者...

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